2020版《中國藥典》 | 當(dāng)歸中33種禁用農(nóng)藥及其單體殘留量的測定解決方案
當(dāng)歸屬于根莖類藥材，是最常用的中藥之一。使用乙腈對當(dāng)歸試樣進(jìn)行均質(zhì)提取，經(jīng)鹽析、離心后，將上清液濃縮、定容，即可對當(dāng)歸中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行測定。
本方法參考2020版《中國藥典》2341通則農(nóng)藥殘留量測定法新增第五法《藥材及飲片（植物類）中禁用農(nóng)藥多殘留測定法》公示稿中的直接提取法，采用睿科AH-30全自動均質(zhì)器進(jìn)行提取，提取液用MPE高通量真空平行濃縮儀進(jìn)行濃縮。在20 ug/kg的加標(biāo)水平下LCMSMS法中30種化合物的回收率在81.3-115.7%之間；在40 ug/kg的加標(biāo)水平下GCMSMS法中33種化合物的回收率在82.5-108.2%之間，滿足禁用農(nóng)藥的檢測要求。
該方法操作方便、提取和濃縮效率高、回收率好，可作為當(dāng)歸中多種農(nóng)殘前處理和分析檢測的有效解決方案。
儀器與試劑
儀器
Raykol AH-30全自動均質(zhì)器
Raykol MPE-16高通量真空平行濃縮儀
Agilent 1290+6470高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀
Agilent 7890B+7000D氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀
試劑
乙腈：HPLC級
GCMSMS法33種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液：40 μg/mL
LCMSMS法30種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液：20 μg/mL
GCMSMS法內(nèi)標(biāo)使用液：磷酸三苯酯 0.1 μg/mL
樣品前處理
準(zhǔn)確稱取5 g試樣（精確至0.01 g）于100 mL離心管中，加入1 g氯化鈉后立即搖散，加入50 mL乙腈
用Raykol AH-30全自動均質(zhì)器在12000轉(zhuǎn)/分鐘的攪拌速度下均質(zhì)2 min，轉(zhuǎn)速4000 r/min下離心5 min
AH-30全自動均質(zhì)器
AH-30全自動均質(zhì)器參數(shù)設(shè)置
將上清液倒入濃縮杯中，殘渣再加入50 mL乙腈，繼續(xù)均質(zhì)1 min，離心5 min
合并兩次提取液，在Raykol MPE-16高通量真空平行濃縮儀中濃縮至3~5 mL
高通量真空平行濃縮儀
MPE-16真空平行濃縮儀參數(shù)設(shè)置
放冷的樣液轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，用乙腈多次潤洗濃縮杯并轉(zhuǎn)移至容量瓶中，最終用乙腈定容至刻度
精確移取1 mL上述定容液，精密加入0.3 mL水后過0.22 μm濾膜，上高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜儀測定
精確移取1 mL上述定容液，精密加入0.3 mL磷酸三苯酯內(nèi)標(biāo)溶液，過0.22 μm濾膜后上氣相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜儀測定
氣質(zhì)聯(lián)用色譜圖
圖-1 33種禁用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的總離子流圖（1 μg/mL）
液質(zhì)聯(lián)用色譜圖
圖-2 30種禁用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的總離子流圖（1 μg/mL）
樣品測試
基質(zhì)加標(biāo)回收實驗
在當(dāng)歸樣品中添加濃度為40 μg/kg的33種農(nóng)藥(GCMSMS)和20 μg/kg的30種農(nóng)藥(LCMSMS)進(jìn)行加標(biāo)回收驗證，使用上述樣品前處理方法，最后分別經(jīng)GCMSMS和LCMSMS檢測，平均回收率和RSD結(jié)果如下所示。
表-3 GCMSMS法33種化合物的平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=3)
表-4 LCMSMS法30種化合物的平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=3)
總結(jié)
分取上清液時為防止下層殘渣倒入濃縮杯中，可在濃縮杯上放置漏斗，并用乙腈潤濕的濾紙將上清液過濾于杯中，并用乙腈潤洗濾紙。
在減壓濃縮過程中需控制好溫度和壓力以防止部分化合物分解和損失，溫度不能超過40°C，壓力不要低于100 mbar。
解決方案優(yōu)勢
本解決方案操作方便、提取和濃縮效率高、回收率好。AH-30全自動均質(zhì)器可自動進(jìn)行中藥樣品的均質(zhì)，且具備刀頭清洗，無需人員值守，避免有機(jī)溶劑毒害，操作簡單、便捷；MPE真空平行濃縮儀采用數(shù)字型的真空控制系統(tǒng)，能精確、實時地檢測真空度，避免樣液中目標(biāo)物在過低真空度下?lián)p失，同時采用水浴加熱和平穩(wěn)的圓周震蕩模式，保證樣品的平行性和可靠性。真正實現(xiàn)中藥樣品的大批量高效快速的前處理。
溫馨提示
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