解決方案丨水中抗生素的測定

近年來，環境水污染問題日益突出，水中藥品及個人護理用品（PPCPs）這類新型污染物也備受關注。抗生素藥物作為其中一類，常伴隨動物的排泄物、屠宰血水等進入地球水循環體系，破壞水體生態。因此開發水中抗生素的檢測方法，對提升自然水體和廢水中抗生素的監測能力具有重要意義。

在水環境中，抗生素的含量一般都較低，直接進分析儀器檢測較難達到儀器的檢出限。固相萃取作為一種富集凈化的技術，能夠很好將檢出限降低，利于后端分析儀器的檢測。本文采用睿科Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀實現對水樣中24種抗生素（磺胺類7個、喹諾酮類5個、β-內酰胺類1個、大環內酯類3個、四環素類4個、氯霉素類3個、林可霉素類1個）的富集與洗脫，洗脫液經睿科Auto EVA 80全自動平行濃縮儀吹干，30%甲醇水溶液復溶，高效液相色譜-串聯質譜儀檢測，內標法定量。在20ng/L的加標水平下，24種抗生素的平均回收率在50%-130%之間，RSD值小于10%。說明本方法可以較好地滿足水中24種抗生素的檢測。

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儀器與耗材

1.1儀器

Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀

Auto EVA 80全自動平行濃縮儀

Agilent 1290+6470高效液相色譜-串聯質譜儀

全自動固相萃取儀

全自動平行濃縮儀

1.2耗材

HLB固相萃取柱 (RayCure，500mg/6mL，貨號：RC-204-36477）

1.3試劑

甲醇（優級純）

濃氨水（分析純）

濃鹽酸（分析純）

乙二胺四乙酸二鈉（分析純）

超純水

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樣品制備

水樣先用0.45μm濾膜過濾，準確量取500mL，加入1g Na2EDTA超聲溶解，用濃鹽酸調節pH=4，待萃取。

2.1富集和濃縮

依次用10mL甲醇和10mL超純水對固相萃取柱進行活化，將水樣以5mL/min的速度進行上樣，之后用10mL超純水淋洗柱子，除去雜質及Na2EDTA。用氮氣將小柱吹干，以5mL甲醇和5mL 5%氨水甲醇洗脫目標化合物(具體步驟請見圖-1)。將洗脫液用Auto EVA 80全自動平行濃縮儀于40℃條件下濃縮至干，加入內標物磺胺甲惡唑-d4、諾氟沙星-d5、羅紅霉素-d7和地美環素30%甲醇水溶液定容至1mL，渦旋混勻，過濾膜上機檢測。

2.2固相萃取條件

圖-1 Fotector Plus固相萃取方法

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結果與討論

為了驗證該方法的準確度和精密度，本實驗向純水樣品(500mL)加入24種抗生素混標進行加標回收驗證(n=4)，加標水平為20ng/L，數據如表-1所示。除四環素類抗生素的回收率小于60%之外，其余抗生素的加標回收率均在60%-130%之間，RSD值控制在10%以內。說明該方法能夠較好地用于水中24種抗生素的檢測。

表-1.純水樣品的加標回收率及RSD值（n=4）

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總結

本方法使用睿科Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀可實現凈化過程的自動化，從活化到上樣、洗脫一步到位；最多一天能夠處理180個樣品，高效便捷地完成固相萃取過程。同時搭配睿科Auto EVA 80高通量全自動平行濃縮儀進行濃縮，二者的樣品架可兼容使用，無需進行樣品轉移，操作連貫簡便，避免樣品的損失。